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三菱厭氧包“三步法”操作指南

更新時間:2025-10-21   點擊次數(shù):536次
  三菱厭氧包(AnaeroPack™系列)作為實驗室厭氧微生物培養(yǎng)的核心耗材,憑借“無需加水、無需催化劑”的便捷性,通過化學(xué)反應(yīng)快速構(gòu)建無氧環(huán)境(30分鐘內(nèi)氧氣濃度降至0%,同步產(chǎn)生約21%CO?),廣泛適配臨床微生物檢測、環(huán)境菌種分離等場景。其“三步法”操作流程圍繞“安全取袋-快速密封-規(guī)范培養(yǎng)”設(shè)計,兼顧效率與精度,具體操作指南如下:
  一、第一步:備樣取袋——基礎(chǔ)準(zhǔn)備與規(guī)范操作
  此步驟核心是確保厭氧包未接觸空氣前保持活性,避免提前反應(yīng)影響效果,需把控“選型-拆封-取袋”三個關(guān)鍵動作:
  適配選型:根據(jù)培養(yǎng)罐容積選擇對應(yīng)規(guī)格厭氧包,標(biāo)準(zhǔn)2.5L培養(yǎng)罐匹配1袋AnaeroPack™-Anaero,3.5L罐需2袋,7.0L罐需4袋;若培養(yǎng)微需氧或嗜二氧化碳菌種,需對應(yīng)選用AnaeroPack™-Microaero或AnaeroPack™-CO?型號。同時檢查鋁塑包裝完整性,若出現(xiàn)破損漏氣則需廢棄,避免失效產(chǎn)品影響培養(yǎng)。
  精準(zhǔn)拆封:用剪刀沿鋁塑包裝上側(cè)預(yù)設(shè)線剪開,動作需快速平穩(wěn),避免剪刀劃破內(nèi)部紙袋。包裝剪開后立即取出紙袋,嚴(yán)禁打開紙袋——紙袋內(nèi)的化學(xué)試劑(如氫硼化物、碳酸鹽復(fù)合物)為密封狀態(tài),打開會導(dǎo)致試劑受潮失效,無法完成產(chǎn)氣反應(yīng)。
  樣品前置:取袋前需將接種好的培養(yǎng)基平板放入密封罐,平板堆疊高度不超過罐容積的2/3,預(yù)留足夠空間供氣體均勻擴散。若培養(yǎng)厭氧菌菌落計數(shù),建議將平板倒置放置,防止冷凝水影響菌落形態(tài)。
  二、第二步:密封啟動——快速操作與環(huán)境構(gòu)建
  此步驟是厭氧環(huán)境形成的關(guān)鍵,核心是“極速密封”,利用三菱厭氧包接觸空氣后的即時反應(yīng)特性構(gòu)建無氧體系:
  即時入罐:取出紙袋后10秒內(nèi)放入密封罐,避免長時間暴露導(dǎo)致提前產(chǎn)氣。若使用多袋厭氧包,需將其分散平鋪在罐底或罐壁兩側(cè),禁止疊放——疊放會導(dǎo)致局部反應(yīng)熱量積聚,影響產(chǎn)氣均勻性,甚至降低氧氣吸收效率。
  密封檢查:放入紙袋后立即蓋緊密封罐蓋,旋轉(zhuǎn)罐蓋至聽到“咔嗒”鎖止聲,確保密封圈貼合罐口??赏ㄟ^“按壓罐蓋測試”驗證密封性:輕壓罐蓋無明顯松動,松手后無氣流聲,即說明密封合格,防止外界空氣滲入破壞厭氧環(huán)境。
  反應(yīng)啟動:密封后厭氧包自動啟動反應(yīng),通過內(nèi)部化學(xué)試劑吸收罐內(nèi)氧氣,同步生成CO?,無需額外添加水或催化劑。此時罐體會輕微發(fā)熱(正常反應(yīng)放熱),屬正?,F(xiàn)象,可放置于室溫環(huán)境等待30分鐘,待反應(yīng)完成后再移入培養(yǎng)箱。
 

 

  三、第三步:培養(yǎng)廢棄——規(guī)范培養(yǎng)與安全處理
  此步驟聚焦“環(huán)境控制-過程觀察-廢棄處理”,保障培養(yǎng)效果與操作安全:
  恒溫培養(yǎng):將密封罐放入培養(yǎng)箱,設(shè)置溫度需≤45℃,超出此范圍會導(dǎo)致厭氧包試劑失效,同時影響微生物生長活性。培養(yǎng)期間可通過透明罐壁觀察菌落生長情況,無需打開罐蓋——密封狀態(tài)下環(huán)境可穩(wěn)定維持整個培養(yǎng)周期,打開會破壞無氧條件。
  效果驗證:若需確認(rèn)厭氧環(huán)境是否達(dá)標(biāo),可在罐內(nèi)放置厭氧指示劑(如美藍(lán)指示管),若指示劑由藍(lán)色變?yōu)闊o色,說明氧氣已去除,可正常培養(yǎng);若仍為藍(lán)色,需檢查密封是否失效或厭氧包是否過期。
  安全廢棄:培養(yǎng)結(jié)束后,先將密封罐置于通風(fēng)處冷卻30分鐘,待厭氧包降溫后再取出——反應(yīng)殘留的化學(xué)試劑可能持續(xù)放熱,高溫狀態(tài)丟棄易引發(fā)風(fēng)險。取出的廢袋需單獨丟棄,禁止與易燃物混放,避免殘余試劑發(fā)生意外反應(yīng)。
  關(guān)鍵注意事項與場景適配
  儲藏要求:未使用的厭氧包需密封存放于陰涼干燥處,避免陽光直射與潮濕環(huán)境,鋁塑袋右下角印有失效期,需在有效期內(nèi)使用,過期產(chǎn)品產(chǎn)氣效率會下降50%以上。
  特殊場景:野外采樣或現(xiàn)場檢測時,可搭配三菱密封袋替代培養(yǎng)罐,操作流程不變,密封袋透明特性便于現(xiàn)場觀察,且重量僅為培養(yǎng)罐的1/10,便攜性更強。
  常見誤區(qū):禁止將不同型號厭氧包混合使用(如厭氧型與微需氧型),會導(dǎo)致氣體濃度紊亂;多袋使用時若空間有限,可借助隔板分隔,確保每袋均能充分接觸空氣完成反應(yīng)。
  通過“備樣取袋-密封啟動-培養(yǎng)廢棄”三步操作,三菱厭氧包可快速構(gòu)建穩(wěn)定厭氧環(huán)境,操作耗時僅需2分鐘,相比傳統(tǒng)厭氧培養(yǎng)箱成本降低60%,且能避免危險氣體使用風(fēng)險,成為中小實驗室厭氧培養(yǎng)的優(yōu)選方案。

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